1 范围 
本标准规定了婴幼儿食品和乳品中泛酸的测定方法。 
本标准适用于婴幼儿食品和乳品中泛酸的测定。 
2 规范性引用文件 
本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 
3 原理 
试样经热水提取等前处理后，经C18 色谱柱分离，紫外检测器检测，外标法定量泛酸的含量。 
4 试剂和材料 
除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。 
4.1 淀粉酶：酶活力≥1.5 U/mg。 
4.2 甲醇(CH4O)：色谱纯。 
4.3 盐酸。 
4.4 硫酸锌(ZnSO4)。 
4.5 盐酸（0.1 mol/L）：移取8.3 mL 盐酸（4.3）于1000 mL 容量瓶中，用水定容。 
4.6 硫酸锌溶液（15 g/100mL）：称取15 g 硫酸锌（4.4）用水溶解并定容至100 mL。 
4.7 磷酸二氢钾溶液（0.05 mol/L）：称取6.8 g 磷酸二氢钾，用水溶解并定容至1000 mL。用磷酸调节pH 至3.0，用0.45 μm 滤膜过滤。 
4.8 泛酸标准溶液 
4.8.1 泛酸标准储备液（1 mg/mL）：准确称取泛酸钙1.087 g，加水溶解并定容至1000 mL。 
泛酸浓度=泛酸钙浓度×0.920 
4.8.2 泛酸标准中间液（0.1 mg/mL）：吸取标准储备液（10.8.1）10 mL 于100 mL 容量瓶中，加水定容。临用前配制。 
5 仪器和设备 
5.1 天平：感量为0.1 mg。 
5.2 高效液相色谱仪，带紫外检测器。 
5.3 超声波。 
5.4 pH 计：精度为0.01。 
5.5 培养箱：55 ℃ ± 2 ℃。 
6 分析步骤 
6.1 试样处理 
6.1.1 不含淀粉类试样处理 
称取混合均匀的固态试样约5 g（精确至0.0001 g）或液态试样约20 g（精确至0.0001 g）于150 mL 
三角瓶中，固体试样加入约30 mL 40 ℃～50 ℃温水，振摇溶解后超声萃取20 min。 
6.1.2 含淀粉类试样处理 
如果试样中含有淀粉，称取混合均匀的固态试样约5 g（精确到0.0001 g）或液态试样约20 g（精确 
到0.0001 g）于150mL三角瓶中，加入淀粉酶（4.1）约0.2 g, 固体试样加入约30 mL 40 ℃～50 ℃温水 
振摇溶解，盖上瓶塞，在50 ℃～60 ℃条件下酶解30 min。 
6.2 测定液的制备 
试样溶液降至室温后，用盐酸（4.5）调节pH 至4.5 ± 0.1，加入5 mL 硫酸锌溶液（4.6），充分 
混合。转入50 mL 容量瓶中，用水定容至刻度并充分混匀后，用滤纸过滤。滤液经0.45 μm 滤膜过滤后， 
即为试样待测液。 
6.3 参考色谱条件 
色谱柱：ODS-C18（粒径 5 μm， 250 mm×4.6 mm ）或具有同等性能的色谱柱。 
流动相：取磷酸二氢钾溶液（4.7）900 mL，取甲醇（4.2）100 mL，混匀后经0.45 μm微孔滤膜 
加压过滤。 
流速：1.0 mL/min。 
检测波长：200 nm。 
柱温：30 ℃ ± 1 ℃。 
进样量：10 μL。 
6.4 测定 
6.4.1 标准曲线测定 
分别准确吸取泛酸标准中间液（4.8.2）1.0 mL，2.0 mL，4.0 mL，8.0 mL，12.0 mL于100 mL容量 
瓶中，加水定容至刻度，得到浓度分别为1.0 μg/mL，2.0 μg/mL，4.0 μg/mL，8.0 μg/mL，12.0 μg/mL的 
泛酸标准工作液，临用前配制。 
将上述泛酸标准工作依次进行色谱测定（其标准样品色谱图见附录A中图A.1），记录色谱峰高（或 
峰面积）。以峰高（或峰面积）为纵坐标，以标准工作液浓度为横坐标绘制标准曲线。 
6.4.2 试样溶液的测定 
吸取试样待测液（6.2）10 μL，将试样待测液进行色谱测定，从标准曲线中查得试液中泛酸的浓 
度。 
7 分析结果的表述 
试样中泛酸的含量按式（1）计算： 
 ……………………………………………………………………（1） 
式中： 
X——试样中泛酸含量，单位为微克每百克（μg/100 g） 
C——试样溶液中泛酸的质量浓度，单位为微克毫升（μg/mL）； 
m ——称取试样的质量，单位为克（g）； 
V——被测样液总体积，单位为毫升（mL）； 
K——样液稀释倍数。 
以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。 
8 精密度 
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10 %。

仪器配置：
LC3000型高效液相色谱仪
P3000型高压输液泵
UV3000紫外－可见光检测器
7725i手动进样阀
色谱柱：C18，250 mm×4.6mm ，100A，5μm。
LCS-3000工作站
启动工具包